时间:01-20人气:13作者:活得比天狂
PCR扩增一般在第25到30个循环时能得到足够的目的基因。前20个循环是指数增长阶段,产物数量快速增加。之后进入平台期,产物增长变慢。具体循环数取决于模板量和反应效率。实验中常用30个循环,既能保证产量又避免非特异性扩增。
PCR扩增特点
扩增初期产物很少,难以检测。每个循环包括变性、退火、延伸三步。变性时双链DNA分开,退火时引物结合,延伸时合成新链。循环次数过多会增加错误,过少则产量不足。优化反应条件可提高特异性,减少非目标产物生成。
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