时间:01-20人气:21作者:人生如扯蛋
PCR实验需要精确控制温度和时间。模板DNA量要合适,太多会导致非特异性扩增,太少则产物不足。引物设计很关键,长度18到22个碱基,GC含量保持在40%到60%。反应体系要混合均匀,避免气泡影响结果。每个循环包括变性、退火、延伸三个步骤,温度设置必须准确。
PCR操作注意事项
PCR实验要防止污染。操作台要清洁,手套和移液枪头不能混用。反应液要现配现用,避免反复冻融。电泳检测时,上样量不能超过孔容量,否则会溢出。阴性对照必不可少,可以判断是否有污染。实验结束后,产物要妥善处理,避免扩散到环境中。
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