pcr第几轮出现等长?

PCR扩增中，等长片段通常在第三轮循环后出现。前两轮循环产物长度不一，从第三轮开始，目标片段会以指数级增长，形成主带。此时短片段优先扩增，长片段可能因竞争减少。第五轮后，目标片段会占据绝对优势，电泳图显示单一明亮条带。非特异性产物在早期可能出现，但随着循环增加会被淘汰。

扩增效率差异

PCR扩增效率受片段长度影响，短片段比长片段扩增快。100碱基以内的片段每轮可增加90%，而1000碱基以上的片段效率降至50%。Taq酶在延伸长片段时速度变慢，导致长片段积累少。25个循环后，短片段浓度可达长片段的10倍以上。优化延伸时间和酶用量能平衡不同长度片段的扩增。