时间:01-18人气:21作者:琉璃娃娃
PCR实验中会加入目标基因的引物、DNA聚合酶、四种核苷酸原料和缓冲溶液。引物是短片段DNA,能结合到目标基因两端,像路标一样指示聚合酶从哪里开始复制。聚合酶负责合成新的DNA链,常用耐高温的Taq酶。核苷酸包括腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶,是搭建DNA的基本材料。缓冲溶液维持合适的酸碱度和离子浓度,确保反应顺利进行。
PCR反应体系
PCR反应体系还包括镁离子和去离子水。镁离子是聚合酶的必需辅助因子,浓度过高或过低都会影响扩增效率。去离子水提供反应介质,避免杂质干扰。有时还会加入dUTP替代dTTP,防止产物污染。整个体系在高温下进行变性、退火和延伸三个步骤,循环30次左右就能将目标基因放大数百万倍,方便后续分析。
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