时间:01-19人气:20作者:风追烟花雨
基因工程中的平末端可以任意连接,但效率较低。平末端没有突出的单链,任何平末端DNA片段都能通过DNA连接酶直接拼接。这种连接方式不需要互补碱基配对,操作简单。不过平末端连接容易发生自环化或串联,导致重组效率不高。实际实验中常采用同聚物加尾或酶切改造等方法提高连接特异性。
平末端连接的限制
平末端连接存在明显缺陷。连接后的DNA片段可能随机组合,无法保证方向正确。例如,将两个平末端载体连接时,可能形成正向或反向重组子。平末端连接还容易产生大片段缺失或插入,影响基因表达稳定性。因此,在需要精确插入方向时,科研人员更倾向于使用黏末端连接技术。
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