双缩脲试剂分别加入还是混合溶液?

双缩脲试剂需要先混合均匀后再加入待测溶液。混合后试剂中的氢氧化钠和硫酸铜会反应生成稳定的铜络合物，这种络合物与蛋白质中的肽键结合产生紫色反应。如果分别加入，硫酸铜会先与蛋白质局部结合，导致反应不均匀或灵敏度下降。

对比

分别加入：操作步骤繁琐，需先加氢氧化钠再加硫酸铜。硫酸铜过量或局部浓度过高时，容易产生蓝色沉淀干扰结果。反应时间延长，且蛋白质变性风险增加，影响检测准确性。适合小批量实验，但重现性较差。

混合后加入：操作简便，只需一步加液。试剂混合后形成均匀的铜络合物，与蛋白质接触更充分，反应速度快且颜色稳定。避免沉淀干扰，适合大批量检测。但需注意混合后试剂稳定性有限，需现配现用。